使用QPix400系统快速将样品复制到琼脂平板

简介                                                                                    

使用QPix400系统可以进行常规的液体样品相同微孔板之间的文库复制(比如从96复制到96孔板，从384复制到384孔板)。但是，将文库样品从琼脂平板到琼脂平板进行固体到固体的复制方式也是一个很有用的工具，比如可以进行基因抗性的筛选，或者进行酵母双杂交筛选。本文描述了如何在QPix400系统上面进行文库复制操作(Figure 1)，比如将样品从液体复制到固体，从固体复制到固体。

将液体样品复制到琼脂固体平板

将E.coli 样品在含有Amp的10ml LB 培养基中37度过夜培养。然后，分别取100ulE.coli 样品到标准96孔板。为了完成本次实验，使用了QPix420系统的复制重排软件模块以及点样头模块(Gridding head)。样品板含有培养后的液体样品，目标微孔板为空的琼脂平板，用于接种样品板中的样品。

优势

增加液体到固体、固体到固体的复制速度和准确性

扩展QPix400系统的应用，用于固体平板筛选克隆，比如筛选抗性、酶活等；用于酵母双杂交等实验。

Figure 1. QPix420系统软件界面：红色标记的文库复制功能位于QPix420系统复制功能模块下面

Figure 2. 文库复制接种高度设置：接种高度需要根据微孔板类型以及琼脂厚度进行调整

文库复制过程中，设置合适的接种高度非常重要。对于样品来源板来说，接种高度要设置到点样针头能够充分接触到96孔板中的液体E.coli 样品。对于目标固体平板来说，接种高度要设置到点样针头刚好接触到O m n i T r a y 的L B 琼脂固体平板(Figure 2)。在文库复制操作完成后，在琼脂平板上可以清晰看到接种样品的点样位置痕迹(Figure 3A)。37度培养2天后，可以看到经过接种的OmniTray LB琼脂平板上，E.coli 样品生长良好(Figure 3B)。

Figure 3. 完成液体 E.coli 样品从标准96孔板复制到OmniTray LB琼脂固体平板后，OmniTray平板的照片：A）接种完成后，OmniTray平板上可以清晰看到96接种针的样品位置痕迹。B）同一块OmniTray平板经过37度2天培养后，每一个接种的样品位置都可以看到明显的生长后的E.coli 克隆，说明文库复制操作可以成功将液体E.coli 样品从96孔样品板转移到OmniTray LB琼脂固体平板

琼脂到琼脂固体平板复制

为了将OmniTray LB琼脂平板上的样品复制到OmniTray LB琼脂平板，同样使用了QPix420系统的文库复制模块和点样头模块。液体到固体复制同样的接种高度也可以用于固体到固体复制的来源板和目标板。来源板含有12*8矩阵样式的E.coli 克隆(如Figure 3B所示)。使用文库复制模块将来源板的克隆接种到另一块OmniTrayLB琼脂平板，目标板在接种后可以清晰看到96个接种样品痕迹。过夜培养后，96个接种样品点都可以清晰看到生长良好的E.coli 克隆(Figure 4)。这说明QPix420系统可以成功的将来源OmniTray平板上的E.coli 克隆转移到目标OmniTray平板上，实现固体到固体平板的克隆复制。

Figure 4. 固体到固体琼脂平板复制完成后目标OmniTray克隆图片。目标OmniTray经过37度过夜培养后，96个接种的E.coli 样品都可以正常生长，说明QPix420系统可以成功将OmniTray LB平板上的克隆样品复制到目标OmniTray LB琼脂平板。

结论

QPix400系列微生物克隆筛选系统可以通过文库复制模块以及点样头模块快速、准确实现液体到固体、固体到固体自动化样品复制操作。