类器官培养神器--p160ROCK小分子抑制剂Y27632
类器官是在体外，经过3D培养，将干细胞培养于基质胶中，在小分子化合物、细胞因子、培养基添加剂等物质作用下培养得到的相应器官类似的组织结构，能够在体外模拟正常（或疾病）状态下体内器官（或组织）的三维结构和生理功能，具有自我更新和自组织能力，适用于分子和细胞生物学分析，在动物和细胞水平之间，为肿瘤研究、药物筛选、再生医学等领域提供了一个更好的解决方案，已被广泛应用于功能组织诱导、疾病模型建立、药物筛选、抗炎试验、临床端研究等多个方面的研究，在基础研究和转化应用中具有很大的应用前景。
随着类器官培养系统和实验技术的不断发展，类器官培养已用于各种组织和器官，包括肠道（小肠/结肠）、胃、肝脏、心脏、肺、前列腺、胰腺、肾脏、乳腺、脑类、视网膜以及内耳等。
Y-27632是一种Rho相关蛋白激酶p160ROCK的小分子抑制剂，对于p160ROCK的Ki值为140 nM，比对其他激酶，包括PKC、cAMP依赖性蛋白激酶，MLCK和PAK，作用强200倍。Y-27632通过靶向结合ROCK-1/2的催化位点，抑制其激酶活性。因此，Y-27632可以作用于Rho介导的应力纤维的形成，抑制G1-S期细胞周期进程和胞质分裂。此外，Y-27632还能够通过调节上皮-间充质过渡样诱导人多能干细胞(hIPSCs)选择性地分化为间胚层谱系。
图1 Y-27632化学结构式(CAS. NO: 146986-50-7)
图2 Y-27632 dihydrochloride化学结构式(CAS. NO: 129830-38-2)
Y027632是干细胞培养过程中不可或缺的神药。在类器官构建过程中，Y-27632可以阻止干细胞的凋亡，提高克隆形成效率(1% ~ 27%)，一般在种板培养的第一次加入，后续换液培养不必添加该小分子。Yoshiki Sasai筛选Y-27632的paper发表于2007年的Nature Biotechnology，至今已被引用上千次。
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