超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒-分析方法-资讯-生物在线

超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒

作者:北京索莱宝科技有限公司 2018-07-20T00:00 (访问量:9937)

货号BC0170

规格:50T/24S

产品内容:

提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存

试剂一:液体15 mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存,用时加27mL蒸馏水配制成悬浊液使用前充分摇匀;

试剂三:液体160μL×1支,4℃保存;

试剂四:液体11mL×1瓶,4℃保存

试验中所需的仪器和试剂:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

产品说明

SODEC 1.15.1.1是一种广泛存在于生物体内的金属酶是重要的氧自由基清除剂,能催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成H2O2O2SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。

通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-)O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜,后者在560nm处有吸收;SOD可清除O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液蓝色越深,说明SOD活性愈低,反之活性越高。

操作步骤:

一、样品的前处理:   

1. 细菌或培养细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500-1000:1 的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。

2. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5-10 的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆;8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。

3. 血清(浆)样品:直接检测。

二、测定步骤:

1. 分光光度计预热30min以上,调节波长至560nm,蒸馏水调零。

2. 测定前将试剂一、二和四37(哺乳动物)或25(其它物种)水浴5min以上。

3. 样本测定(在EP管中加入下列试剂)

4. 

试剂名称

测定管

对照管

空白管1

空白管2

试剂一(μL

240

240

240

240

试剂二(μL

510

510

510

510

试剂四(μL

180

180

180

180

  μL

90

90

 

 

蒸馏水(μL

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