Cosmo Bio的骨吸收检测试剂盒是一种多组分试剂盒，可以用于破骨细胞的培养、分化和骨吸收定量评估。该试剂盒采用检测荧光信号的方法，荧光信号来自于与平板结合的磷酸钙释放到培养基中的荧光胺标记的硫酸软骨素的积累。
骨吸收检测试剂盒利用荧光磷酸钙(CaP)作为骨细胞吸收活性的底物。培养板(包含在试剂盒中，也可以单独出售)预先包被有合成结晶碳酸磷灰石，该物质是一种天然磷灰石的替代品。在使用前，CaP包被的板会结合荧光胺标记的硫酸软骨素(包含在试剂盒中，也可以单独出售)。然后破骨细胞吸收会导致标记的硫酸软骨素从与板上结合的磷酸钙中释放出来。释放的标记硫酸软骨素通过荧光测定来定量。该试剂盒还允许进行传统的Pit分析。另外值得注意的是，也有文献(Heo, S. C. et al. Int J Mol Sci 22, 695 (2021)和Steller, D., Scheibert, A., Sturmheit, T. & Hakim, S. G. Sci Rep-uk 10, 16861 (2020))在细胞共培养实验设计中使用该试剂盒，CaP预包被板与trans-well小室一起使用。
● 产品优势：
➡️ 通过检测培养基样品的荧光来测定骨吸收过程
➡️ 获得全世界研究人员认可的成熟方法，且不需要拍照
➡️ 便于使用的CaP预包被板孔
➡️ 组分都经过无菌处理
➡️ 荧光激发和发射波长与FITC相同。请注意:使用不含酚红的培养基
➡️ 检测的同时允许显微镜观察细胞形态
➡️ 去除细胞后允许进行Pit面积测定且可以使用图像分析软件
➡️ 适用于评估破骨细胞对双膦酸盐等药物的反应
● 产品使用实例
图A. RAW264细胞与RANKL (100 ng/mL)在CaP包被的平板上培养6天的相差显微镜照片。OC表示观察到破骨细胞样细胞的位置。
图B. 去除细胞后的平板照片。肉眼可观察到Pits(左图无RANKL；右图有RANKL)。
图C. 在CaP包被的平板上形成的Pits的显微照片(用RANKL)。
图D. Pits面积的RANKL依赖性增加结果(mean±S.D，n = 3)。
图E. 二膦酸盐帕米膦酸盐对RANKL (100 ng/mL)诱导的CaP吸收的抑制作用结果。
● 使用该试剂盒的注意事项：
➡️ 使用不含酚红的培养基来减少背景荧光。
➡️ 破骨细胞分化活性随细胞类型和培养条件而变化。已知含有HEPES的培养基可调节分化活性。在使用该试剂盒之前，我们建议您使用常规组织培养板来确认您的培养基有促进细胞分化的能力。
➡️ 避免板子受强光照射。
➡️ 为了有效刺激细胞，我们建议RANKL浓度≥ 100ng/ml。
➡️ 因为RANKL刺激会影响细胞附着，所以在更换培养基时要小心。
➡️ 由于荧光强度随pH值而变化，并且在酸性条件下较低，我们建议在测量荧光强度时使用“骨吸收测定缓冲液”(货号CSR-BRA-B1)。
➡️ 荧光胺标记的硫酸软骨素降低了破骨细胞的分化。然而，这种减少不足以影响一组双膦酸盐药物的评估。但由于还是对骨吸收测量存在潜在影响，请您在评估已知与硫酸软骨素相互作用的药物时谨慎选择该试剂盒。
➡️ 某些高浓度的双膦酸盐(≥ 100μM)会导致荧光胺标记的硫酸软骨素（FACS）从CaP包被的板子上释放。
● 订购详情：
🔹骨吸收检测试剂盒（Plate+FACS+Buffer）
| 货号 | 产品 | 规格 | 保存温度 |
| CSR-BRA-4P | Bone Resorption Assay Kit 4 试剂盒组分： ●. 1 x 4 well calcium phosphate (CaP) coated plate ●. 1 bottle FACS (fluorosceinamine labeled chondroitin sulfate) ●. 1 bottle Bone Resorption Assay Buffer |
1kit | Below 4℃ |
| CSR-BRA-24KIT | Bone Resorption Assay Kit 24 试剂盒组分： ●. 1 x 24 well calcium phosphate (CaP) coated plate ●. 1 bottle FACS (fluorosceinamine labeled chondroitin sulfate) ●. 1 bottle Bone Resorption Assay Buffer |
1kit | Below 4℃ |
| CSR-BRA-48KIT | Bone Resorption Assay Kit 48 试剂盒组分： ●. 1 x 48 well calcium phosphate (CaP) coated plate ●. 1 bottle FACS (fluorosceinamine labeled chondroitin sulfate) ●. 1 bottle Bone Resorption Assay Buffer |
1kit | Below 4℃ |
| CSR-BRA-48X2KIT | Bone Resorption Assay Kit 48x2 试剂盒组分： ●. 2 x 48 well calcium phosphate (CaP) coated plate ●. 2 bottle FACS (fluorosceinamine labeled chondroitin sulfate) ●. 1 bottle Bone Resorption Assay Buffer |
1kit | Below 4℃ |
| CSR-BRA-96KIT | Bone Resorption Assay Kit 96 试剂盒组分： ●. 1 x 96 well calcium phosphate (CaP) coated plate ●. 2 bottle FACS (fluorosceinamine labeled chondroitin sulfate) ●. 1 bottle Bone Resorption Assay Buffer |
1kit | Below 4℃ |
| CSR-BRA-96X2KIT | Bone Resorption Assay Kit 96x2 试剂盒组分： ●. 2 x 96 well calcium phosphate (CaP) coated plate ●. 2 bottle FACS (fluorosceinamine labeled chondroitin sulfate) ●. 1 bottle Bone Resorption Assay Buffer |
2kit | Below 4℃ |
| CSR-BRA-S96KIT | Bone Resorption Assay Kit 96 stripwell 试剂盒组分： ●. 1 x 96 well stripwell calcium phosphate (CaP) coated plate ●. 2 bottle FACS (fluorosceinamine labeled chondroitin sulfate) ●. 1 bottle Bone Resorption Assay Buffer |
1kit | Below 4℃ |
| CSR-BRA-S96X2KIT | Bone Resorption Assay Kit 96 stripwellx2 试剂盒组分： ●. 2 x 96 well stripwell calcium phosphate (CaP) coated plate ●. 2 bottle FACS (fluorosceinamine labeled chondroitin sulfate) ●. 1 bottle Bone Resorption Assay Buffer |
2kit | Below 4℃ |
🔹骨吸收检测板子
| 货号 | 产品 | 规格 | 保存温度 |
| CSR-BRA-24P | Bone Resorption Assay Plate 24 ●. 1 x 24-well calcium phosphate (CaP) coated plate |
1 Plate | Room temperature Dark,sterile |
| CSR-BRA-48P | Bone Resorption Assay Plate 48 ●. 1 x 48-well calcium phosphate (CaP) coated plate |
1 Plate | Room temperature Dark,sterile |
| CSR-BRA-48X2P | Bone Resorption Assay Plate 48x2 ●. 2 x 48-well calcium phosphate (CaP) coated plate |
2x1 Plate | Room temperature Dark,sterile |
| CSR-BRA-96P | Bone Resorption Assay Plate 96 ●. 1 x 96-well calcium phosphate (CaP) coated plate |
1 Plate | Room temperature Dark,sterile |
| CSR-BRA-96X2P | Bone Resorption Assay Plate 96x2 ●. 2 x 96-well calcium phosphate (CaP) coated plate |
2x1 Plate | Room temperature Dark,sterile |
| CSR-BRA-S96P | Bone Resorption Assay Plate 96 stripwell ●. 1 x 96-well stripwell calcium phosphate (CaP) coated plate |
1 Plate | Room temperature Dark,sterile |
| CSR-BRA-S96X2P | Bone Resorption Assay Plate 96 stripwellx2 ●. 2 x 96-well stripwell calcium phosphate (CaP) coated plate |
2x1 Plate | Room temperature Dark,sterile |
🔹FACS和buffer
| 货号 | 产品 | 规格 | 保存温度 |
| CSR-BRA-FACS1 | Bone Resorption Assay FACS ●. 1 bottle FACS (fluorosceinamine labeled chondroitin sulfate) |
13ml | Below 4℃ Dark,sterile |
| CSR-BRA-B1 | Bone Resorption Assay Buffer ●. 1 bottle Bone Resorption Assay Buffer |
10ml | Below 4℃ Dark,sterile |
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