Solarbio作为一家全国先进的小分子化合物供应商,其产品的安全性和有效性已经被大量文献证实,仅2021年SCI发表文献中,使用索莱宝产品的文献近10000篇,在Nature、Cell等顶级刊物上的文章也层出不穷。同时,我们提供详尽的化学信息和生物学信息,并提供说明书、MSDS、质量报告等文件,旨在打造令客户满意的放心平台。
Solarbio小分子化合物系列产品已推出了数年,期间不少产品被用户频繁的订购,并发表了不错的文章,也常有用户循着文献的痕迹找到Solarbio的产品进行采购使用。本期为大家介绍最为常见的产品类型之一—抗生素。
抗生素(Antibiotics)是由微生物(包括细菌、真菌、放线菌属)或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类次级代谢产物或人工合成的类似物,能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质。在筛选稳定表达株、抑制微生物或肿瘤细胞、调节细胞等方面发挥重要作用。
Solarbio小分子系列的抗生素种类多、范围广、性价比高,包含氨苄、两性霉素、G-418、庆大霉素等常用的抗生素,可广泛用于筛选、抑菌、诱导表达、细胞活力测定等相关实验。
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抗生素特点
01
直接作用于菌体细胞
抗生素则能选择性地作用于菌体细胞DNA、RNA和蛋白质合成系统的特定环节,干扰细胞的代谢作用,妨碍生命活动或使停止生长,甚至死亡。
02
具有选择性抗生谱
抗生素的作用具有选择性,不同抗生素对不同病原菌的作用不一样。对某种抗生素敏感的病原菌种类称为该抗生素的抗生谱(抗菌谱)。
03
有效作用浓度
抗生素是一种生理活性物质。各种抗生素一般都在很低浓度下对病原菌就发生作用。各种抗生素对不同微生物的有效浓度各异,通常以抑制微生物生长的最少浓度作为抗生素的抗菌强度,简称有效浓度。
抗生素作用机理
1
阻碍细菌细胞壁的合成,导致细菌在低渗透压环境下膨胀破裂死亡。
2
与细菌细胞膜相互作用,增强细菌细胞膜的通透性、打开膜上的离子通道,让细菌内部的有用物质漏出菌体或电解质平衡失调而死。
3
与细菌核糖体或其反应底物(如tRNA、mRNA)相互作用,抑制蛋白质的合成。
4
阻碍细菌DNA的复制和转录,阻碍DNA复制将导致细菌细胞分裂繁殖受阻,阻碍DNA转录成mRNA则导致后续的mRNA翻译合成蛋白的过程受阻。
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G-418 disulfate(IG0010)是一种氨基糖苷类抗生素,是稳定转染经常使用的抗性筛选试剂。通过抑制转座子Tn601,Tn5的基因,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞产生毒素。当neo基因被整合进真核细胞DNA后,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达,使细胞获得抗性而能在含有G-418的选择性培养基中生长。
一般的,筛选哺乳动物细胞,推荐起始筛选浓度为400μg/mL;筛选植物细胞,推荐起始筛选浓度为10μg/mL;筛选酵母,推荐起始浓度为500μg/mL。根据起始浓度的效果可以再适当升高或降低G-418的工作浓度。
嘌呤霉素是一种抑制protein synthesis的氨基糖苷类抗生素,能够特异地抑制原核和真核核糖体上的肽链转移,常用于筛选特定携带pac基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。在某些特定情况下,嘌呤霉素亦可以用来筛选转化携带pac基因质粒的大肠杆菌菌株。
一般的,筛选哺乳动物细胞推荐筛选浓度为1-10 μg/mL,最佳浓度建议通过杀灭曲线来确定;大肠杆菌:LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌,使用浓度为125μg/mL。(注:使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节,而且受宿主细胞本身的影响。)
潮霉素B是一种抑制原核和真核细胞的氨基糖苷类抗生素,通过干扰移位、促进70S核糖体的误译来抑制蛋白质合成。潮霉素B是一种非常有用的选择性标记,用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。
一般的,潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型、培养基、生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000 μg/mL。哺乳动物细胞:50-500 μg/mL;细菌/植物细胞:20-200 μg/mL;真菌:300-1000μg/mL。(对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线来确定最佳筛选浓度。)
杀稻瘟菌素是一种常用抗生素,也是DNA和蛋白质合成的抑制剂,可用于筛选携带brs或BSD抗性基因的转染细胞。
一般的,E. coli推荐使用浓度为50-100μg/mL;哺乳动物细胞推荐使用浓度为1-50μg/mL。初次实验建议通过杀灭曲线来确定最佳使用浓度。
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