产品简介:
POLOdeliverer™ 3000是一种具有自主知识产权、独特配方的阳离子型转染试剂,具有转染效率高、低毒性和易于使用等优点,适用于常规哺乳动物细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建。POLOdeliverer™ 3000跟常规转染试剂相比具有如下优势:
1) 一步转染,转染前和转染后均不需要换液,操作简单;
2) 高转染效率,从而可以得到较高水平的蛋白表达;
3) 对细胞毒性低,对细胞生长无影响;
4) 对贴壁细胞和悬浮细胞的瞬时转染或稳定转染均有效;
5) 适用于微孔板转染,也适用于生物反应器的大量转染;
6) 能高效转染很多细胞,如HEK293, CHO, COS-7, HeLa, HepG2, MDCK, PC12, HT29, NIH-3T3, MCF7, Vero, SF9等,尤其对293系列、HCT116效果更佳;
产品包装:
产品货号 |
产品规格 |
CT001-1 |
30ul |
CT001-2 |
750ul |
CT001-3 |
1.5 ml |
贮藏条件:
建议2-8℃保存,无菌取用。2-8℃下可稳定保存半年,切忌反复冻融。
用POLOdeliverer™ 3000转染质粒DNA或dsRNA的基本步骤:
1) 转染前一天接种细胞到12孔板中,每孔接种1×105细胞于0.8ml完全培养基,在37℃,5% CO2条件下孵育过夜,使转染前细胞密度达到60%-80%。
2) 取2ug DNA或2-20pmol dsRNA和4ul POLOdeliverer™ 3000分别稀释到100ul DMEM中(RPMI1640或opti-MEM亦可),混匀后室温放置5min。
3) 将上述POLOdeliverer™ 3000溶液滴加到DNA或dsRNA溶液中,轻轻混匀后室温下放置15min。
4) 将上述混合物均匀滴加到培养基中,轻轻摇匀培养皿,转染前不需要换液。
5) 将转染的细胞在37℃,5%CO2条件下培养48-72h,转染后不需要换液,能满足细胞正常生长的营养即可。也可根据实验需要,在转染12-24h后换液。
6) 质粒DNA转染48-72小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或进行稳定细胞系的筛选。dsRNA转染6-24小时后收样检测。