小鼠单克隆抗体制备
产品名称： 小鼠单克隆抗体制备
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更新时间： 2023-08-11T10:26:26
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一、服务内容
1.抗原准备；
2.免疫Balb/C小鼠；
3.小鼠抗血清检测（WB/ELISA检测内源性蛋白）；
4.检测结果合格进行细胞融合及细胞株的筛选、亚克隆、建立稳定分泌抗体的细胞株；
5.细胞株分泌抗体重链（Fcγ）亚型鉴定；
6.抗体扩大生产、制备腹水以及Protein A/G纯化。
二、抗原要求
1.蛋白抗原：蛋白总量>4mg、浓度＞1mg/ml、纯度>85%、分子量>10KDa；
2.多肽抗原：多肽重量>4mg、纯度>95%；
3.细菌等抗原：咨询。
三、收费标准
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步骤 |
内容 |
时间 |
标准 |
收费 |
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免疫 |
三次免疫后（效价达不到融合要求继续免疫）测尾血效价 |
10周 |
免疫5只Balb/c小鼠，免疫量100ug/只,最终达到融合效价>1:10000 |
￥2000 |
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融合 |
采用已优化的条件进行高效融合 |
1天 |
取脾脏分离成单细胞与对数期的SP2/0按5：1混合，进行细胞融合，20%胎牛血清，HAT选择培养基，铺10块板 |
￥8000 |
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上清 |
融合7天后，ELISA检测，用检测抗原包被ELISA板，二抗anti-mouse HRP，TMB显色 |
1天 |
阴性（正常培养基）OD<0.1阳性OD>0.5视为阳性孔 |
￥6000 |
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亚克隆 |
对阳性孔采用有限稀释法进行亚克隆直到含有细胞的所有孔均为阳性 |
3周 |
ELISA检测挑选OD值高的细胞孔，进行后续亚克隆直到含有细胞的所有孔均为阳性 |
￥10000 |
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定株 |
阳性稳定的孔进行扩大培养 |
1周 |
扩大培养上清，按客户要求进行功能检测（WB/ELISA/IHC），满足客户要求后，将应客户要求交付3株细胞（每株细胞2管） |
￥6000 |
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腹水 |
指定细胞株生产10mL腹水 |
1周 |
离心后10mL腹水 |
￥4000 |
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亚型 |
应客户要求测定细胞株亚型 |
1周 |
测定重链和轻链亚型 |
￥2000 |
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纯化 |
ProteinA或G纯化10mL腹水 |
1周 |
根据亚型选择ProteinA或G |
￥2000 |
四、客户提供材料
1.蛋白抗原、多肽抗原、细菌等；
2.抗原信息及相关文献（可选）。
五、提交给客户结果
1.实验报告；
2.细胞株、抗体。
六、服务说明
1.多肽合成需要另行收费；
2.抗血清检测如果不能达到我们的要求（1:10000以上），不进行后续实验服务；
3.特殊要求另行协商；
4.磷酸化、甲基化、乙酰基化等特殊修饰单抗另行协商。
5.最终提供10mg抗体，超过10mg，收费标准为100元/1mg.